SYBR Green I 20× for PCR
SYBR Green I與dsDNA 結合熒光信號可增強800~1000倍。在PCR反應體系中,加入過量SUPER Green I熒光染料,它特異性地摻入DNA雙鏈后,熒光信號增強,而不摻入鏈中的SUPER Green I染料分子熒光不變,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。熒光可以在退火階段或者延伸階段測定。
儲存條件:?-20°C保存。
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產品介紹:
SYBR Green?I與dsDNA 結合熒光信號可增強800~1000倍。在PCR反應體系中,加入過量SYBR Green I熒光染料,它特異性地摻入DNA雙鏈后,熒光信號增強,而不摻入鏈中的SYBR Green I染料分子熒光不變,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加完全同步。熒光可以在退火階段或者延伸階段測定。
1.使用濃度對熒光PCR結果的影響
SYBR Green I的使用濃度是保證熒光定量PCR實驗成功非常關鍵的因素。如果SYBR Green I的濃度過低會使熒光信號的變化降低,這就意味著低拷貝的樣品可能無法檢出。而在高濃度時,將會抑制PCR反應,降低PCR反應效率。所以一般在使用SYBR Green I時應根據實際情況優化使用濃度,反應的終濃度為1×到0.2×之間。
2.Mg2+濃度的影響
提高Mg2+濃度可以降低SYBR Green I對PCR反應的抑制作用。我們建議在用SYBR Green I進行熒光PCR反應時,Mg2+濃度比無SYBR Green I 的普通 PCR 反應高出0.5~3mM。
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