儲存溫度：

TEV?Protease(10 U/μl)長期儲存于-80℃，可保存2年；或小量分裝后保存于-20℃，可保存6個月，避免反復凍融。10×TEV?Buffer置于-20℃保存即可。

產品介紹：

TEV Protease (煙草蝕紋病毒蛋白酶；Tobacco etch virus protease) 是來源于煙草蝕紋病毒(TEV) Nla的重組蛋白酶，此蛋白酶被用來切除純化后融合蛋白的親和標簽。TEV Protease具有很強的位點特異性，能夠識別EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu- Tyr-Phe- Gln-Gly)，最普通的是ENLYFQG，其切割位點在谷氨酰胺和甘氨酸或絲氨酸之間。該酶在PH 5.5-8.5和4-30℃的廣泛范圍內皆有活性，使得反應條件的選擇可根據目的蛋白的情況而修改。TEV Protease自大腸桿菌表達經親和純化的重組蛋白酶。TEV Protease帶有多聚組氨酸標簽，酶切反應完畢后可通過親和層析去除。

酶活性單位定義：

在1×TEV Buffer (50 mM Tris-HCl, pH8.0, 0.5 mM?EDTA,?1?mM DTT) 中，30℃條件下反應1 h，能夠切割3 μg的反應底物達85%以上所需的酶量定義為一個活性單位。

應用：融合蛋白標簽剪切去除。

操作方法：?

? 若蛋白為熱不穩定性，請在4℃孵育較長時間或增加酶的用量。

? 1.在 EP 管中配置如下反應體系：

? 2.混勻上述體系后于30℃孵育，在 1、2、4、6小時分別吸出30 μl上述反應液，置于單獨的EP管中。

? 3.向上述EP管中加入30μl 2×SDS Loading Buffer, 置于-20℃。

? 4.樣品全部反應完成后，樣品煮沸5 min，取30-40 μL進行SDS-PAGE分析。確定最佳反應時間。

注意事項：

為達到最好的酶切效果，請保證重組蛋白為部分或完全純化的蛋白。