HotStart Taq DNA Polymerase (5U/μl)
儲存條件:-20℃保存
制品說明:
? HotStart Taq DNA Polymerase 是一種新型的通過基因改造的熱啟動酶,該酶在低溫時沒有活性,94℃加熱后開始反應(yīng),同時它還利用一個單鏈DNA黏合蛋白,即single-strand DNA binding protein將primer遮蔽起來,實現(xiàn)引物隔離。以避免在常溫下就開始進(jìn)行非專一性的結(jié)合。直到DNA因高溫被分開,primer才被釋放與目標(biāo)DNA進(jìn)行黏合。可以提高目的DNA擴(kuò)增的特異性和擴(kuò)增效率。通過有效的抑制引物形成二聚體且不破壞聚合酶功能,此方法相較于傳統(tǒng)PCR的方法大大提高了DNA產(chǎn)物的特異性。PCR產(chǎn)物3′端帶A,可直接用于TA克隆。
活性單位:1 單位(U)HotStart Taq DNA Polymerase活性定義為在74℃、30分鐘內(nèi),以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板引物,將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。
質(zhì)量控制:SDS-PAGE 檢測純度大于99%,經(jīng)檢測無外源核酸酶活性;PCR方法檢測無宿主殘余DNA,能有效地擴(kuò)增人基因組中的單拷貝基因;室溫存放一周,無明顯活性改變。
酶貯存緩沖液:
? ? 20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1 mM EDTA, 1mM DTT, 100 mM KCl, Stabilizers, 50% glycerol。
? ? 5×HotStart Taq Buffer (含Mg2+):
? ? 100 mM Tris-HCl (pH 8.4), 100 mM KCl, 50 mM(NH4)2 SO4,7.5 mM MgCl2以及其他成分。
適用范圍:可用于復(fù)雜模板的擴(kuò)增、多重PCR、短鏈和長鏈DNA片斷的擴(kuò)增。產(chǎn)物可以直接用于TA載體克隆。
(具體操作詳見說明書)