T4 DNA Ligase
濃 ? ?度：?5U/μl
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產品概述：
?在有Mg2+和ATP存在的條件下，T4 DNA Ligase能催化雙鏈?DNA或RNA上相鄰的5′-磷酸末端和3′-羥基末端形成磷酸二酯鍵。該酶不僅能夠催化雙鏈DNA的平末端或粘性末端之間的連接，還可以修復雙鏈?DNA、RNA?或?DNA/RNA?雜交雙鏈中的單鏈切刻，但不能催化單鏈?DNA?之間的連接。
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保存條件：-20℃保存。
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酶儲存緩沖液：
?10 mM Tris-HCl (pH 7.5)?，50mM KCl，1mM DTT，?0.1mM EDTA，50% (v/v) glycerol。
? ? ? ?5 × T4 DNA Ligase Buffer
?250 mMTris-HCl (pH 7.5)，?50mM MgCl2，50mM DTT，?5mM ATP，連接促進劑。
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來? ? ?源：純化于攜帶T4 DNA ligase?基因?的E. coli?菌株。
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抑制劑和熱失活：
? ? 大于200mM的NaCl或KCl可以強烈抑制連接酶活性。65℃加熱?10分鐘或70℃加熱5分鐘即可失活。
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單位定義：
?在37℃，20分鐘內交換1 nmole?的32PPi所需要的酶量定義為一個Weiss單位。本產品酶1U(Weiss Unit)相當于200個粘性末端單位。在T4 DNA?連接酶反應緩沖液中，16℃條件下，30分鐘能夠使50%的經Hind?III消化的λDNA?片段連接所需要的酶量為一個粘性末端單位。
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質量控制：
?藍白斑分析實驗表明白斑數小于2%;過量T4 DNA Ligase?混合超螺旋質粒檢測實驗表明無核酸酶檢出；SDS-PAGE檢測重組蛋白純度大于99%。
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（具體操作詳見說明書）
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