服務概述

? ??合成速度快，純度高，質量好。

服務簡介

? ? 近年來，隨著生物工程技術的迅猛發展，人工合成Oligo DNA的需求量也越來越大，已經成為分子生物學實中最基礎的試劑之一。因此，合成Oligo DNA的質量的優劣，將會直接影響到科研人員實驗計劃是否能順利進。所以，使用高質量的合成Oligo DNA制品就變得尤為重要。

? ? Biomed已有近十年合成Oligo DNA制品的經驗，為國內客戶提供了數以萬計的高品質的Oligo DNA合成制品，成功地應用于分子生物學的各個領域，受到了客戶的一致好評，贏得了良好的聲譽，成為用戶信賴的首選品牌。

? ??Biomed合成Oligo DNA制品有如下特點：

? ? ①儀器好：美國進口ABI3900和MerMade 192合成儀，除合成量可成規模外，合成純度高。

? ? ②質量高：使用試劑均為原裝進口，可保證合成高質量的DNA制品。

? ? ③純度高：在MerMade 192合成儀純度高的基礎上又推出OPC純化、PAGE純化兩種級別制品，客戶可根據實驗需要進行選擇。我們保證對每個制品都進行嚴格的質量檢測。

? ??④速度快：保證當天的訂單當天合成，OPC純化制品2天內發貨，PAGE純化制品3天內發貨。

DNA合成原理

? ? 化學合成的基本過程便是在合成過程中盡可能的將不需要的基團暫時保護起來，在一輪縮合反應之后，再將上一輪基團上的保護基選擇性的脫下來，以形成專一的磷酸二酯鍵。目前主要使用的是固相亞磷酰胺三酯法。對此方法的最簡單描述是：溶液中的單體通過縮合反應形成3'→5'磷酸二酯鍵從而連接到固相支持物上。下面是較詳盡的描述：

? ? 反應步驟

? ??第一步：去封閉（Deblocking），用三氯乙酸（TCA）去除CPG所連核苷上的DMT,以暴露5 '羥基，供下一步縮合。此步需要注意TCA為一較強的酸，可能會有脫嘌呤作用,故TCA與寡核苷酸接觸時間不要超過規定時間。

? ??第二步：活化(Activation),在縮合之前，單體與四唑混合并進入合成柱，此時四唑提供一個質子給3'磷酸上二異丙胺基的N原子，質子化的二異丙胺是一個良好的游離基團，與四唑形成亞磷酰胺四唑這種活性中間體。此步四唑過量保證了單體活化充分。

? ? 第三步：連接(Coupling)，亞磷酰胺四唑與CPG所連的核苷酸碰撞時，與其5 '羥基發生親核反應，發生縮合并脫掉四唑，合成的寡核苷酸鏈延伸一個核苷酸單體。此步單體相對于CPG所連核苷酸上5 ' -羥基過量保證了連接的高效率。

? ??第四步：蓋帽(Capping),為了防止未反應的與CPG相連的5 '羥基在隨后的循環中被延長，需要在連接反應充分進行之后使之封閉，常用乙酰化來封閉此羥基。臨用前混合乙酸酐和N-甲基咪唑等形成一活性很強的乙酰化試劑，與少量未參與連接反應的5 '羥基縮合成酯鍵。

? ? 第五步：氧化(Oxidation)，連接反應后新加上的核苷酸單體通過亞磷酯鍵（磷為三價）與CPG上相連的寡核苷酸鏈連接，此亞磷酯鍵不穩定，易被酸、堿水解，因此需將此處三價磷氧化為五價的磷。常用的氧化劑為碘的四氫呋喃溶液。

? ? 循環上述一至五步，寡核苷酸鏈即可延伸至所需長度。合成過程中可以觀察TCA處理階段的顏色判定合成效率。

? ? 合成后處理

? ??切割與脫保護基：將合成好的寡核苷酸鏈從支持物上化學切割下來。常用新鮮的濃氨水來裂解CPG與初始核苷間的酯鍵。斷裂下來的寡核苷酸帶有自由的3 '羥基。

? ? 純化：根據所合成寡核苷酸的組成和應用來選定純化的方法。常用的純化方法有：C18柱、OPC柱、PAGE和HPLC。本公司暫時不提供HPLC純化。

? ? 定量：根據寡核苷酸在260nm處的紫外吸收來定量。

? ? 儲存：分裝抽干。

Biomed DNA合成制品

? ? Biomed DNA合成部提供普通DNA合成制品、長鏈DNA合成制品、修飾DNA合成制品及標記DNA合成制品。普通DNA合成制品分別有OPC純化、PAGE純化二種級別，您可以根據實驗需要選擇使用合適級別的制品。